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操縱步驟

實驗開始前，各試劑均應(yīng)平衡至室溫，試劑不能直接在37 溶解；試劑或樣品配制時，均需充分混勻，混勻時盡量避免起泡。實驗前應(yīng)猜測樣品含量，如樣品濃度過高時，應(yīng)對樣品進(jìn)行稀釋，以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測范圍，計算時再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。

1、 加樣：分別設(shè)空缺孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔。空缺孔加樣品稀釋液 100 ，余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品100 ，留意不要有氣泡，加樣 時將樣品加于酶標(biāo)板底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻，酶標(biāo)板加上蓋或覆膜，37 溫育2小時。為保證實驗結(jié)果有效

性，每次實驗請使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。

2、 棄往液體，甩干，不用洗滌。每孔加檢測溶液A工作液 100 （臨用前配制），酶標(biāo)板加上覆膜，37 溫育1小時。

3、 棄往孔內(nèi)液體，甩干，洗板 3次，每次浸泡1-2分鐘，大約400 /每孔，甩干（也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干）。

4、 每孔加檢測溶液B工作液（臨用前配制）100 ，加上覆膜，37 溫育1小時。

5、 棄往孔內(nèi)液體，甩干，洗板5次，方法同步驟3。

6、 每孔加底物溶液90 ，酶標(biāo)板加上覆膜37 避光顯色（反應(yīng)時間控制在15-30分鐘，當(dāng)標(biāo)準(zhǔn)孔的前3-4孔有明顯的梯度藍(lán)色，后3-4孔梯度不明顯時，即可終止）。

7、 每孔加終止溶液50 ，終止反應(yīng)，此時藍(lán)色立轉(zhuǎn)。終止液的加進(jìn)順序應(yīng)盡量與底物    液的加進(jìn)順序相同。

8、 立即用酶標(biāo)儀在450nm波長丈量各孔的光密度（ 值）。

說明

1、  由于現(xiàn)有條件及科學(xué)技術(shù)水平尚不能對所有供貨商提供的所有原料進(jìn)行全面的鑒定與分析，

    本產(chǎn)品可能存在一定的質(zhì)量技術(shù)風(fēng)險。

2、  *的實驗結(jié)果與試劑的有效性、實驗者的相關(guān)操縱以及當(dāng)時的實驗環(huán)境密切相關(guān)，請務(wù)必

預(yù)備充足的標(biāo)本備份。

3、 在儲存及溫育過程中避免將試劑暴露在強光中。所有試劑瓶蓋須蓋緊以防止蒸發(fā)和微生物的   污染，由于蛋白水解酶的干擾將導(dǎo)致出現(xiàn)錯誤的結(jié)果。

4、 試劑盒保存：請收到試劑盒后盡快將標(biāo)準(zhǔn)品、檢測溶液A和檢測溶液B保存于-20 ，其余試劑短期保存請置于4 ，長期保存則置于-20 。開封后的酶標(biāo)板要密封加干燥劑后保存于-20 ，避免濕潤。

5、 濃洗滌液會有鹽析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶。

6、 剛開啟的酶聯(lián)板孔中可能會有少許水樣物質(zhì)，此為正?，F(xiàn)象，不會對實驗結(jié)果造成任何影響。

7、 有效期：6個月。

8、 本操縱說明適用于48T試劑盒，但48T試劑盒所有試劑減半。