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 　　EIA/ELISA技術(shù)在60年代提出，因?yàn)榫哂徐`敏度高、特異性強(qiáng)，酶免疫試劑的性質(zhì)比較穩(wěn)定，操作方法簡(jiǎn)便快速、無(wú)放射性污染以及應(yīng)用范圍廣等很多優(yōu)點(diǎn)，迅速在醫(yī)學(xué)基礎(chǔ)理論研究，臨床病毒學(xué)和生物化學(xué)檢驗(yàn)等工作中獲得了廣泛的應(yīng)用。這篇文章中Lequin博士追述了EIA和ELISA技術(shù)的發(fā)展歷程。

　　當(dāng)初我們?cè)贠ranon開展這個(gè)項(xiàng)目的初衷只是由于當(dāng)時(shí)Oranon管理部門熱衷于 多年前 免疫化學(xué)診斷妊娠的成功（以血清抑制凝集試驗(yàn)和乳膠凝集試驗(yàn) 為基礎(chǔ)）。但是由于工程太大 ，需耗時(shí)較多而阻止了該項(xiàng)技術(shù)的的深入發(fā)展。Schuurs提出將酶附著于抗原或者抗體，通過化學(xué)反應(yīng)的測(cè)定終產(chǎn)物顏色這一設(shè)想時(shí)，大家都表示了贊同。因?yàn)橐?一種 簡(jiǎn)易的可以根據(jù)顏色變化而即插即讀的試紙條作為基礎(chǔ)，似乎可以取得進(jìn)一步的成功。我們采用了分析妊娠HCG來作為我們研究的模型。盡管如此，Schuurs對(duì)于這項(xiàng)技術(shù)將來的應(yīng)用仍然非常清楚。正象他在試驗(yàn)建議的zui后一句話所說的那樣：我認(rèn)為，探索這項(xiàng)技術(shù)所取得的任何成功，都將開辟免疫學(xué)診斷的新領(lǐng)域。

　　早期的研究過程中我們至少在試驗(yàn)原理上還是取得了一定的進(jìn)展，但是盡管我們盡zui大努力去發(fā)展以EIA技術(shù)為基礎(chǔ)的根據(jù)顏色變化而診斷妊娠的即插即讀的技術(shù)時(shí)，還是失敗了。將許多必需的試劑壓縮到一個(gè)試紙條上，并且在模板上使反應(yīng)過程標(biāo)準(zhǔn)化，在那個(gè)時(shí)間看起來還需要解決很多技術(shù)問題。實(shí)際上，在Oranon研究組發(fā)現(xiàn)了溶膠顆粒免疫測(cè)定（SPIA）技術(shù)發(fā)明后，依靠顏色變化診斷妊娠的問題也就變得可行了。總結(jié)以前的研究經(jīng)驗(yàn)，我們改變了原來的研究方向。如內(nèi)分泌領(lǐng)域（我們的目的是直接想同RIA競(jìng)爭(zhēng)），感染病領(lǐng)域。zui初是檢測(cè)乙型肝炎檢測(cè)，該領(lǐng)域在前些年澳抗被作為乙型肝炎病毒感染的標(biāo)志物被發(fā)現(xiàn)后就進(jìn)行了一些探索。

　　同時(shí)，我們也借鑒學(xué)習(xí)了Engvall和Perlmann以及隨后的學(xué)者開展的關(guān)于ELISA和EIA的研究，而我們主要的研究領(lǐng)域是細(xì)菌、寄生蟲和病毒，尤其是London的Voller、Bidwell以及荷蘭國(guó)家公共衛(wèi)生研究所的Ruitenberg所做的工作。當(dāng)時(shí)領(lǐng)域內(nèi)所使用的方法如免疫熒光，血清凝集實(shí)驗(yàn)，補(bǔ)體結(jié)合實(shí)驗(yàn)比較的笨拙，相比較而言ELISA和EIA法的簡(jiǎn)易性決定了它將來在廣泛的微生物感染診斷中能夠獲得快速的發(fā)展。能夠迅速為大家所接受，促進(jìn)了眾多的生物醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室和第三世界的國(guó)家建立了一種可靠的感染性疾病診斷方法。

　　當(dāng)時(shí)，這種方法只被局限地應(yīng)用于少數(shù)高度專業(yè)的實(shí)驗(yàn)室。Voller和Bidwell首先應(yīng)用了96孔微板用于EIA/ELISA實(shí)驗(yàn)，也就是現(xiàn)在廣泛應(yīng)用的ELISA試劑盒的雛形，由此也引發(fā)了*次免疫分析自動(dòng)化的浪潮。我們?cè)贠ranon也使用了這種方法檢測(cè)乙型肝炎和其他獻(xiàn)血篩查項(xiàng)目。

　　RIA法及早進(jìn)入內(nèi)分泌學(xué)和腫瘤學(xué)方面的應(yīng)用領(lǐng)域并且趨于成熟，它的性和靈敏度也超過了興起不久的EIA和ELISA技術(shù)，而且很多實(shí)驗(yàn)室都已經(jīng)配備了放射性核素的相關(guān)設(shè)備，并且習(xí)慣了與之開展工作，他們還不能意識(shí)到非同位素檢測(cè)的優(yōu)勢(shì)。是自動(dòng)化改變了這些，RIA的自動(dòng)化牽涉到放射性同位素引起的容器和廢物處理問題，而EIA和ELISA卻使全自動(dòng)隨機(jī)存取的免疫分析系統(tǒng)成為可能，該系統(tǒng)正是80年代診斷儀器制造商努力開拓的方向。這就導(dǎo)致了許多低成本的、設(shè)備簡(jiǎn)單，可靠性強(qiáng)的免疫化學(xué)診斷方法從專業(yè)的放射性實(shí)驗(yàn)室進(jìn)入了普通化學(xué)實(shí)驗(yàn)室。EIA和ELISA也因此找到了他在診斷感染性疾病以外的應(yīng)用領(lǐng)域。

Oranon管理部門處理所采用的策略，也是EIA和ELISA技術(shù)取得成功的決定性因素。70年代中期，眾多公司匯集于Oranon，都希望得到當(dāng)局的許可。管理層在經(jīng)過長(zhǎng)時(shí)間的討論后，決定不壟斷該技術(shù)，而是將該技術(shù)轉(zhuǎn)讓給任何達(dá)到了許可條件的公司，因?yàn)樵摷夹g(shù)在實(shí)驗(yàn)室診斷醫(yī)學(xué)中已經(jīng)廣泛應(yīng)用，并且不斷擴(kuò)展，后來總共一百多張?jiān)S可證的數(shù)據(jù)來說明當(dāng)時(shí)的情況是十分貼切的。我相信這項(xiàng)措施對(duì)實(shí)驗(yàn)室診斷醫(yī)學(xué)是有所幫助的，有時(shí)候也會(huì)設(shè)想，當(dāng)其他公司為zui近一項(xiàng)重要的技術(shù)而采用了一種相同的許可政策時(shí)，在將來會(huì)獲得怎樣的進(jìn)展，產(chǎn)生怎樣的影響。

　　回顧過去，我仍然對(duì)我們當(dāng)初嘗試一種妊娠診斷方法都帶來了結(jié)果感到吃驚！